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显微镜百科丨神秘光学显微镜

时间: 2020-12-10 09:51 编辑: 北京瑞科中仪阅读:

光学显微镜涵盖范围广,应用种类多,除了我们在常研究中提及到的几款类型显微镜外,光学显微镜还可以细分为很多不同使用方法和原理的显微镜,因为很少提及,所以尤为神秘。
显微镜百科丨神秘光学显微镜
双光子荧光显微镜是结合了激光扫描共聚焦显微镜和双光子激发技术的一种新技术。双光子激发的基本原理是:在高光子密度的情况下,荧光分子可以同时吸收 2 个长波长的光子,在经过一个很短的所谓激发态寿命的时间后,发射出一个波长较短的光子;其效果和使用一个波长为长波长一半的光子去激发荧光分子是相同的。双光子激发需要很高的光子密度,为了不损伤细胞,双光子显微镜使用高能量锁模脉冲激光器
显微镜百科丨神秘光学显微镜 
双光子荧光显微镜有很多优点:长波长的光比短波长的光受散射影响较小,容易穿透标本;焦平面外的荧光分子不被激发,使较多的激发光可以到达焦平面,使激发光可以穿透更深的标本;长波长的近红外光比短波长的光对细胞毒性小;使用双光子显微镜观察标本的时候,只有在焦平面上才有光漂白和光毒性。所以,双光子显微镜比单光子显微镜更适合用来观察厚标本、更适合用来观察活细胞、或用来进行定点光漂白实验。
显微镜百科丨神秘光学显微镜
全内反射荧光显微镜是利用光线全反射后在介质另一面产生衰逝波的特性,激发荧光分子以观察荧光标定样品的极薄区域的一款新型显微镜。其观测的动态范围通常在200 nm以下。因为激发光呈指数衰减的特性,只有极靠近全反射面的样本区域会产生荧光反射,大大降低了背景光噪声干扰观测指标,故此项技术广泛应用于细胞表面物质的动态观察。该显微镜信噪比高,分辨率高,对生物样本的损伤小,可进行活体物质的研究和单分子的动态研究。
全内反射荧光显微镜正是凭其独特的优势,从而成为研究细胞表面科学如生物化学动力学,单分子动力学的最有前途的光学成像技术。现在全内反射荧光显微技术已被广泛应用于:实时观察单个肌浆球蛋白分子的运动;单个蛋白分子对之间的荧光共振能量转移:聚合物单个分子的结构变化;生物质膜附近的神经分泌腺的颗粒运动等。全内反射荧光显微术的发展一方面会在加强传统优势的基础上,即动态观察生物大分子的结构,相互作用,物质的分泌,同时在不断地改进物镜和CCD相机的性能基础上进一步同其他仪器的结合,更多的用在生物细胞活体方面的研究。

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